原代細胞分離培養(yǎng)技術主要應用在哪些方面？

原代細胞分離培養(yǎng)是指通過體細胞分離，分離出一組同質(zhì)性的細胞群體，并在合適的營養(yǎng)液和環(huán)境條件下，使其在體外繁殖生長的過程。這種細胞培養(yǎng)技術被廣泛應用于生物學、醫(yī)學、細胞和遺傳工程等領域，是現(xiàn)代生物技術的基礎。原代細胞分離培養(yǎng)的過程較為復雜，首先需要獲得生物組織的細胞，對于不同來源的細胞，其分離技術也不盡相同。例如，從動物組織中獲取細胞，可以采用膠原酶切割的方法，以便使細胞更容易分離。而從植物體中取得細胞，則需要去除胚乳和子葉，然后通過針管分離的方法，將細胞挑選出來。每一種分離方...

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胎牛血清FBS可以用在哪里？

胎牛血清FBS用作真核細胞體外細胞培養(yǎng)的生長補充劑。動物血清（牛血清和其它動物血清）都用于細胞培養(yǎng)，其中使用廣泛的是胎牛血清（FBS）。FBS含有生長因子和極低水平的抗體，因此在許多不同的細胞培養(yǎng)應用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分，包括蛋白質(zhì)，電解質(zhì)，脂質(zhì)，碳水化合物，激素，酶和其他不確定的成分，這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細胞生長都是必需的。與其它類型血清相比，胚胎期動物血清含有更多的生長因子，及較少的gamma球蛋白含量。此外，跟新生動物血清和成體動...

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細胞功能研究都研究些什么？

細胞是組成機體結構和功能的基本單位，所以細胞的功能是生理學中一項重要的研究內(nèi)容。細胞膜也稱質(zhì)膜，主要由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，還有少量糖類物質(zhì)。一般而言，功能活躍的細胞，膜蛋白含量較高；而在功能簡單的細胞，則膜蛋白含量較低。目前以液態(tài)鑲嵌模型學說為主。細胞功能研究都研究些什么？細胞的基本功能：1、細胞膜的物質(zhì)轉(zhuǎn)運功能：2、細胞的電活動：包括兩大類：靜息電位和動作電位。（1）靜息電位：安靜時細胞膜兩側(cè)處于外正內(nèi)負的狀態(tài)稱為靜息電位，又稱為極化。產(chǎn)生原因：鈉泵的生電效應使膜內(nèi)負值增大，...

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要根據(jù)實際情況選擇適合的細胞凋亡檢測方法

細胞凋亡（apoptosis）是一種在多細胞生物體中發(fā)生的程序性細胞死亡形式，屬于細胞的正常生理過程，在生物體進化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及發(fā)育過程中起著重要作用，具有重要生物學意義及復雜的分子生物學機制。在生物學研究過程中常常需要檢測細胞凋亡情況。目前至少有十數(shù)種檢測細胞凋亡的方法，大致可分為基于細胞形態(tài)、生物學功能和生化標記三大類。每一方法都有其優(yōu)缺點，需要根據(jù)實際情況選擇適合的細胞凋亡檢測方法。1、電子顯微鏡檢測方法在透射電鏡下，凋亡細胞體積變小。凋亡Ⅰ期（pro-apopto...

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充質(zhì)干細胞都具有哪些基本特性？

充質(zhì)干細胞是組織的建造者和功能維持者：在組織形態(tài)發(fā)生中負責搭建腳手架，分化出骨骼、軟骨、脂肪、纖維等結締組織，構成器官發(fā)育框架結構；而且，間充質(zhì)干細胞可以分泌數(shù)十種因子，為各種分化細胞提供所需營養(yǎng)。其基本特性包括：1、強大的增殖能力和多向分化潛能：在適宜的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肌細胞、神經(jīng)細胞、肝細胞、內(nèi)皮細胞、基質(zhì)細胞等多種細胞的能力。2、免疫調(diào)節(jié)功能：通過細胞間的相互作用及產(chǎn)生細胞因子干擾樹突狀細胞功能并抑制T細胞的增殖及其免疫反應，從而發(fā)揮...

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耐藥細胞株的服務內(nèi)容包括哪些？

耐藥細胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結合大劑量間歇沖擊的方法，誘導腫瘤細胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性，從而建立相應的耐藥細胞系。細胞株的服務內(nèi)容包括哪些？1、在體外，低濃度梯度遞增結合大劑量間歇沖擊誘導細胞產(chǎn)生耐藥性。2、藥物對親代細胞和耐藥細胞的IC50用2。MTT法，計算耐藥指數(shù)。目前已知的體外建立耐藥細胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中，常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細胞化療耐藥模型。...

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工具細胞株具有高轉(zhuǎn)染率、實驗周期短的特點

細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株，是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸，引起細胞本身生物化學過程的改變，細胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細胞逐漸對藥物耐受。工具...

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標記細胞株的分離和培養(yǎng)要注意些什么？

標記細胞株是細胞系中特定標簽（Luc、GFP、RFP等）的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移，該細胞系可用作示蹤細胞，為細胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標記細胞株的分離和培養(yǎng)：1、在無菌條件下，取出1-3DSD大鼠的心房組織，然后用PBS清洗組織塊兩次，然后將組織切成1mm3左右；2、在組織塊中加入4ml酶消化液（0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶），懸停10s，37℃消化10min，然后用滴定管吹成單細胞懸液，自然沉淀收集取上清，用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃；3、剩余組織加入3～4m...

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